NY∕T 3063-2016 马铃薯抗晚疫病室内鉴定技术规程(农业)
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ID： |
A03C794B85FC46A28DB34424FECA14CA |
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文件大小(MB)： |
0.85 |
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页数： |
11 |
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日期： |
2021-12-27 |
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ICS 65.020,B 16 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY/T 3063一2016,马铃薯抗晚疫病室内鉴定技术规程,Code of practice for evaluation of potato resistance to late blight in greenhouse,2016 - 12 - 23 发布2017 - 04 - 01 实施,中华人民共和国农业部发布,目Ij r:=:I,本标准按照GB/T 1. 1-2009 给出的规则编写,本标准由农业部种子管理局提出并归口,本标准起草单位: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所,本标准主要起草人:杨宇红、谢丙炎、冯兰香、茹振J iI 、凌键、陈国华,NY/ T 3063-2016,I,NY / T 3063-2016,马铃薯抗晚疫病室内鉴定技术规程,1 范围,本标准规定了马铃薯抗晚疫病Clate blight) 离体叶片和盆栽鉴定方法与评价标准,本标准适用于马铃薯(5olαη um tub三届自明民也-矗副材料对晚疫病抗性的室内鉴定及评价,2 术语和定义,下列术语和定义,2. 1,马铃薯晚,由致病疫,种流行性卵,溶化后，于(1 21,3. 3. 2 选择性黑,当100 mL 灭菌,素、利福平和制霉菌素,3. 3. 3 黑麦粒培养基,在50mL 离心管中加入3 . 3 g,注意灭菌时不要将管盖完全拧紧，灭菌后,3. 4 对照材料,h ，用捣碎机捣碎,使培养基中氨节青霉,后，于(1 21 士l) OC 高压灭菌15 mino,以马铃薯‘底西瑞(Desiree) ，或‘费乌瑞它CFavurit) ，等感病品种为感病对照,3. 5 育苗基质,将草炭、蛙石和菜田土按体积2 : 1 : 11昆1 合均匀，于(134 士l) OC湿热灭菌1 h。或直接购买商品化,蔬菜育苗基质,3. 6 其他用品,培养皿、托盘、离心管、烧杯、量筒、锥形瓶、纱布、滤纸、酒精灯、细菌过滤器、小型手持喷雾器、育苗,钵等,1,NY/ T 3063-2016,4 仪器设备和设施,4.1 显微镜,放大倍率:40 倍~ 1 000 倍,4. 2 恒温培养箱,温度范围: 00C ~5 00C ，温度波动不大于l OC ,4. 3 高压灭菌锅,灭菌温度范围: 104 oC ~ 135,0,C ，灭菌时间范围:4 min~120 min. 最高工作压力: O. 25 MPa ~O . 22,孔IPa ,4. 4 移液器,量程体积: 2μL ~ 20μL ，系统误差: 士1. 2 % ，随机误差: :::!::O.6 % ,4. 5 电子天平,称量范围:0 g ~ l 000 g ，分度值: 0 . 01 g ,4. 6 捣碎机,额定转速: 10000 r / min~ 12 000 r / min ， 处理量:500 mL，工作方法: 断续,4. 7 超净工作台,洁净等级100 级@ 二三O . 5μm ，菌落数: ~ O. 5 个/ (皿. h) (~90 mm 培养平皿) ，平均风速:,O. 25 m/ 5~0 . 6 m/ 50,4. 8 人工接种鉴定室,具备人工调节、温度、温度及光照的条件，使人工接种后具备良好的发病环境,5 鉴定方法,5. 1 离体叶片法,5. 1. 1 材料育苗,将供鉴定材料及感病对照的种薯置于150C~200C 下催芽。待薯芽长1 cm ~ 1. 5 cm 时，将种薯切成,每块只带1 个健康芽眼的薯块，芽眼朝下播于装有育苗基质的育苗钵内，每钵播种1 块，置于日光温室,里，温度保持在18 0C ~ 250C ，常规水肥管理，自然光照。待幼苗长到7 片~ 10 片复叶时，选择生长一致、,健壮的幼苗用于抗病性鉴定,5. 1. 2 接种体制备,见附录13 0,5. 1. 3 接种,从植株顶部计起，取第3 、4 、5 片展开叶，背面朝上置于双层湿润灭菌滤纸上，在每个小叶叶背主叶,脉的一侧用微量移液器滴加10μL 浓度为8 X 1 03 个子包子囊/ mL 的抱子囊悬浮液。每份材料设3 个重,复，每重复不少于6 片复叶,5. 1.4 接种后管理,接种后将容器用保鲜膜封好，置于18 0C ~200C 光照培养箱内， 在每一日光照16 h ，黑暗8 h ，相对湿度,100 % 条件下培养,5. 1. 5 病情调查,5. 1. 5. 1 调查方法,接种后5 d ~ 6 d ，以复叶的每片小叶为调查单位，测定病斑面积及观察有元子包子囊和霉层，根据表1,中的病害症状描述，逐份材料进行调查，记载接种叶片病情级别,NY/T 3063-2016,5. 1.5.2 病情级别划分,马铃薯抗晚疫病离体叶片法鉴定的病情级别划分见表1 ,表1 马铃薯抗晚疫病离体叶片法鉴定的病情级别划分,病情级别症状描述,O 接种叶叶片上无症状,仅在叶片上出现针尖大小的枯死斑,2 病斑直径小于0 . 5 cm ，周围元褪绿晕圈,3 病斑直径O. 5 cm~ 1. 0cm ，病斑水浸状且周围有退绿晕圈，病斑表面可见到白色菌丝体,4 病斑继续扩大，占叶片总面积的1 / 2. 病斑周围有明显的褪绿圈， 并有明显的白色霉层,3 病斑占叶片面积的2 3 以上，病斑表面有大量的白色霉状物，并出现组织坏死,5. 1. 5.3 病情指数计算,病情指数(D J)按式(1)计算,>:(5 X η),DI = ~.. .. _ X 1 00 ………………………………… … ω NXS,式中:,DI 一一病情指数;,5 一→各病情级别数值;,n 一一一各病情级别的病叶(株)数;,N 一一-调查的总叶(株)数;,……
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